Elisa試劑盒是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性，酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性，又保留酶的活性。在測定時(shí)，受檢標(biāo)本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體，也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高，間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果，使測定方法達(dá)到很高的敏感度。 ELISA可用于測定抗原，也可用于測定抗體。
 

　　Elisa試劑盒的使用小貼士：
 

　　一、溫度
 

　　1.試劑盒回溫
 

　　大多數(shù)ELISA檢測試劑盒為冷藏(2℃-8℃)保存。從冰箱拿出來后，先不要急于打開試劑盒，要等試劑盒的溫度平衡至室溫且試劑盒盒表面無冷凝水。檢測所用的試劑需充分混勻且*溶解后再用。
 

　　Tips：提前1~2小時(shí)取出試劑盒，放在室溫中；或在預(yù)設(shè)25℃恒溫培養(yǎng)箱中平衡30分鐘~60分鐘。
 

　　2.環(huán)境溫度的控制
 

　　實(shí)驗(yàn)室可采用以下措施控制溫度：
 

　　1)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)配備溫濕度表，且確保定期計(jì)量。
 

　　2)根據(jù)天氣情況設(shè)定實(shí)驗(yàn)室空調(diào)制冷或加溫功能，待室溫穩(wěn)定且無干擾的條件下再開始檢測流程。
 

　　3)選用帶溫控裝置的孵育儀器，如恒溫孵育器、恒溫培養(yǎng)箱、多功能酶標(biāo)儀等。注意要提前開啟預(yù)熱。
 

　　Tips：大多數(shù)試劑盒加樣后反應(yīng)時(shí)間較短，環(huán)境溫度對檢測結(jié)果會(huì)有很大影響，所以控制好環(huán)境溫度是保證試劑盒檢測結(jié)果有效的重要因素。
 

　　3.孵育
 

　　孵育時(shí)要保證溫度均勻，防止揮發(fā)變干。孵育時(shí)使用封板膜，并置于暗處孵育。多塊板一起實(shí)驗(yàn)時(shí)，要平放各板，不要疊放，避免溫度擴(kuò)散的不均勻性或邊緣效應(yīng)。
 

　　二、剩余試劑的妥善保存
 

　　試劑盒恢復(fù)至室溫后，取出要使用的酶標(biāo)板孔，未使用的酶標(biāo)板孔應(yīng)及時(shí)放回鋁箔袋，加入干燥劑，封緊封口，2℃-8℃冷藏保存。
 

　　Tips：切忌將未*平衡至室溫的酶標(biāo)板放回鋁箔袋，因?yàn)榇藭r(shí)由于溫度差，酶標(biāo)板上會(huì)有水汽，不利于穩(wěn)定保存。
 

　　三、加樣
 

　　1.加樣要快速準(zhǔn)確，時(shí)間宜控制在15分鐘內(nèi)。
 

　　2.如樣品量較大，可分次完成實(shí)驗(yàn)，或?qū)y樣液置于預(yù)混微孔板中使用多通道移液器快速移取。
 

　　3.吸取同一試劑，可將試劑倒入V型加樣槽中，使用多通道移液器快速移取。
 

　　Tips：在加樣槽上套上一次性PE手套，再倒入檢測用試劑，可以保證試劑完整性且不被污染。加樣槽更換一次性手套后可繼續(xù)下一種試劑的使用。